1. Цел: Тази процедура има за цел да осигури стандартизирана процедура за асептични операции и защита на стерилни помещения.
2. Обхват на приложение: лаборатория за биологични тестове
3. Отговорно лице: Тестер за контрол на качеството
4. Определение: Няма
5. Предпазни мерки
Стриктно извършвайте асептични операции, за да предотвратите микробно замърсяване; операторите трябва да изключат UV лампата, преди да влязат в стерилното помещение.
6. Процедури
6.1. Стерилната стая трябва да бъде оборудвана със стерилна операционна зала и буферно помещение. Чистотата на стерилната операционна зала трябва да достигне клас 10000. Температурата в помещението трябва да се поддържа на 20-24°C, а влажността - на 45-60%. Чистотата на чистата работна маса трябва да достигне клас 100.
6.2. Стерилното помещение трябва да се поддържа чисто и е строго забранено да се трупат отпадъци, за да се предотврати замърсяване.
6.3. Стриктно предотвратявайте замърсяването на цялото оборудване за стерилизация и хранителни среди. Тези, които са замърсени, трябва да спрат да ги използват.
6.4. Стерилното помещение трябва да бъде оборудвано с дезинфектанти с работна концентрация, като например 5% разтвор на крезол, 70% алкохол, 0,1% разтвор на хлорметионин и др.
6.5. Стерилното помещение трябва редовно да се стерилизира и почиства с подходящ дезинфектант, за да се гарантира, че чистотата на стерилното помещение отговаря на изискванията.
6.6. Всички инструменти, прибори, съдове и други предмети, които трябва да бъдат внесени в стерилно помещение, трябва да бъдат плътно опаковани и стерилизирани по подходящи методи.
6.7. Преди да влезе в стерилната стая, персоналът трябва да си измие ръцете със сапун или дезинфектант, след което да се преоблече в специално работно облекло, обувки, шапки, маски и ръкавици в буферната стая (или да избърше ръцете си отново със 70% етанол) преди да влезе в стерилната стая. Извършва операции в бактериална камера.
6.8. Преди използване на стерилната стая, ултравиолетовата лампа в стерилната стая трябва да бъде включена за облъчване и стерилизация за повече от 30 минути, а чистата маса трябва да бъде включена за обдухване с въздух едновременно. След приключване на операцията, стерилната стая трябва да се почисти своевременно и след това да се стерилизира с ултравиолетова светлина за 20 минути.
6.9. Преди проверката външната опаковка на изпитваната проба трябва да се запази непокътната и не трябва да се отваря, за да се предотврати замърсяване. Преди проверката използвайте памучни тампони със 70% алкохол, за да дезинфекцирате външната повърхност.
6.10. По време на всяка операция трябва да се направи отрицателен контрол, за да се провери надеждността на асептичната операция.
6.11. Когато абсорбирате бактериална течност, трябва да използвате вакуумна топка, за да я абсорбирате. Не докосвайте сламката директно с устата си.
6.12. Иглата за инокулация трябва да се стерилизира с пламък преди и след всяка употреба. След охлаждане културата може да се инокулира.
6.13. Сламките, епруветките, петриевите панички и други прибори, съдържащи бактериална течност, трябва да се накиснат в кофа за стерилизация, съдържаща 5% разтвор на лизол за дезинфекция, и да се извадят и изплакнат след 24 часа.
6.14. Ако върху масата или пода е разлята бактериална течност, незабавно излейте 5% разтвор на карболова киселина или 3% Lysol върху замърсената зона за поне 30 минути, преди да я третирате. Когато работното облекло и шапките са замърсени с бактериална течност, те трябва незабавно да се свалят и изперат след стерилизация с пара под високо налягане.
6.15. Всички предмети, съдържащи живи бактерии, трябва да бъдат дезинфекцирани преди изплакване с течаща вода. Строго е забранено замърсяването на канализацията.
6.16. Броят на колониите в стерилното помещение трябва да се проверява ежемесечно. При отворена чиста маса вземете няколко стерилни петриеви панички с вътрешен диаметър 90 mm и асептично инжектирайте около 15 ml хранителна агарова културална среда, която е разтопена и охладена до около 45°C. След втвърдяване, поставете ги с дъното нагоре при 30 до 35°C. Инкубирайте в продължение на 48 часа в инкубатор при 30 до 35°C. След доказване на стерилността, вземете 3 до 5 панички и ги поставете отляво, по средата и отдясно на работното място. След отваряне на капака и излагане на условията за 30 минути, поставете ги с дъното нагоре в инкубатор при 30 до 35°C за 48 часа и ги извадете. Средният брой на различните бактерии в паничката в чиста зона клас 100 не трябва да надвишава 1 колония, а средният брой в чиста стая клас 10000 не трябва да надвишава 3 колонии. Ако лимитът бъде превишен, стерилното помещение трябва да бъде старателно дезинфекцирано, докато многократните проверки отговарят на изискванията.
7. Вижте главата (Метод за проверка на стерилността) в „Методи за проверка на хигиената на лекарствата“ и „Стандартни оперативни практики на Китай за проверка на лекарствата“.
8. Отдел „Дистрибуция“: Отдел „Управление на качеството“
Техническо ръководство за чисти помещения:
След като се получи стерилна среда и стерилни материали, трябва да поддържаме стерилно състояние, за да изучаваме специфичен известен микроорганизъм или да използваме неговите функции. В противен случай, различни микроорганизми отвън могат лесно да се смесят. Феноменът на смесване на неподходящи микроорганизми отвън се нарича замърсяване на бактерии в микробиологията. Предотвратяването на замърсяване е критична техника в микробиологичната работа. Пълната стерилизация, от една страна, и предотвратяването на замърсяване, от друга, са два аспекта на асептичната техника. Освен това, трябва да предотвратим изтичането на изследваните микроорганизми, особено патогенни микроорганизми или генетично модифицирани микроорганизми, които не съществуват в природата, от нашите експериментални контейнери във външната среда. За тези цели в микробиологията има много мерки.
Стерилната стая обикновено е малка стая, специално обзаведена в микробиологична лаборатория. Може да бъде изградена с чаршафи и стъкло. Площта не трябва да бъде твърде голяма, около 4-5 квадратни метра, а височината трябва да бъде около 2,5 метра. Извън стерилната стая трябва да се изгради буферна стая. Вратата на буферната стая и вратата на стерилната стая не трябва да са обърнати в една и съща посока, за да се предотврати внасянето на различни бактерии от въздушния поток. Както стерилната стая, така и буферната стая трябва да са херметически затворени. Вътрешната вентилация трябва да има устройства за филтриране на въздуха. Подът и стените на стерилната стая трябва да са гладки, трудни за замърсяване и лесни за почистване. Работната повърхност трябва да е равна. Както стерилната стая, така и буферната стая са оборудвани с ултравиолетови лампи. Ултравиолетовите лампи в стерилната стая са на 1 метър от работната повърхност. Персоналът, влизащ в стерилната стая, трябва да носи стерилизирани дрехи и шапки.
В момента стерилните помещения съществуват предимно в микробиологичните фабрики, докато общите лаборатории използват чисти маси. Основната функция на чистите маси е да използват устройство за ламинарен въздушен поток за отстраняване на различни малки прахове, включително микроорганизми, от работната повърхност. Електрическото устройство позволява на въздуха да преминава през HEPA филтър и след това да навлиза в работната повърхност, така че работната повърхност винаги да е под контрола на потока стерилен въздух. Освен това има високоскоростна въздушна завеса от страната близо до външната страна, за да се предотврати навлизането на външен бактериален въздух.
В места с трудни условия, вместо чиста маса могат да се използват и дървени стерилни кутии. Стерилната кутия има опростена конструкция и е лесна за преместване. Има два отвора отпред на кутията, които се затварят с вратички тип „push-pull“, когато не се използва. Можете да изпъвате ръце навътре по време на работа. Горната част на предната част е снабдена със стъкло, което улеснява вътрешната работа. Вътре в кутията има ултравиолетова лампа, а приборите и бактериите могат да се поставят през малка вратичка отстрани.
Асептичните оперативни техники в момента не само играят ключова роля в микробиологичните изследвания и приложения, но се използват широко и в много биотехнологии. Например, трансгенни технологии, технологии с моноклонални антитела и др.
Време на публикуване: 06 март 2024 г.